肽工艺

蛋白质分离方法:根据蛋白质溶解度不同和分子

发表时间:2019-02-11 13:59

      (一)根据蛋白质溶解度不同我们可将蛋白质的分离纯化方法分为:盐析,等电点沉淀法和低温有机溶剂沉淀法
      蛋白质的盐析是利用溶液的浓度差与渗透作用原理的一种方法,一般来说,盐的浓度会影响蛋白质的溶解度,当盐浓度升高后,蛋白质的溶解度增加,这个过程就叫盐溶。而当盐浓度升高到一定的程度的时候,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析。所以我们经常将大量盐加到蛋白质溶液中,使得蛋白质分子“失水”,于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出,从而进行蛋白质的分离与纯化。而在盐析过程中,温度,PH值,蛋白质浓度都会影响蛋白质的盐析。温度越低,更容易盐析。

      而大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶解度最低。蛋白质浓度低,也可以促进盐析。蛋白质的等电点沉淀分离纯化法是利用PH和电子溶解的原理,因为蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小,因而溶解度也最小,各种蛋白质的等电点有差别,可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀,但此法很少单独使用,可与盐析法结合用。而低温有机溶剂沉淀法:用与水可混溶的有机溶剂,甲醇,乙醇或丙酮,可使多数蛋白质溶解度降低并析出,此法分辨力比盐析高,但蛋白质较易变性,应在低温下进行。
 
蛋白质分离方法:根据蛋白质溶解度不同和分子大小的差别
 
      (二)根据蛋白质分子大小的差别我们可将蛋白质的分离纯化方法分为:透析与超滤,和凝胶过滤法
      蛋白质的透析与超滤都是利用蛋白质的分子大小不同进行的分离,透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。超滤法则是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。蛋白质的凝胶过滤法也称分子排阻层析或分子筛层析,这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶和琼脂糖凝胶。
 
 
相关资讯400-960-9603
推荐产品400-960-9603