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蛋白质分离方法：根据蛋白质溶解度不同和分子
发表时间：2019-02-11 13:59
（一）根据蛋白质溶解度不同我们可将蛋白质的分离纯化方法分为：盐析，等电点沉淀法和低温有机溶剂沉淀法
蛋白质的盐析是利用溶液的浓度差与渗透作用原理的一种方法，一般来说，盐的浓度会影响蛋白质的溶解度，当盐浓度升高后，蛋白质的溶解度增加，这个过程就叫盐溶。而当盐浓度升高到一定的程度的时候，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析。所以我们经常将大量盐加到蛋白质溶液中，使得蛋白质分子“失水”，于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出，从而进行蛋白质的分离与纯化。而在盐析过程中，温度，PH值，蛋白质浓度都会影响蛋白质的盐析。温度越低，更容易盐析。
而大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶解度最低。蛋白质浓度低，也可以促进盐析。蛋白质的等电点沉淀分离纯化法是利用PH和电子溶解的原理，因为蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小，因而溶解度也最小，各种蛋白质的等电点有差别，可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀，但此法很少单独使用，可与盐析法结合用。而低温有机溶剂沉淀法：用与水可混溶的有机溶剂，甲醇，乙醇或丙酮，可使多数蛋白质溶解度降低并析出，此法分辨力比盐析高，但蛋白质较易变性，应在低温下进行。
而大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶解度最低。蛋白质浓度低，也可以促进盐析。蛋白质的等电点沉淀分离纯化法是利用PH和电子溶解的原理，因为蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小，因而溶解度也最小，各种蛋白质的等电点有差别，可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀，但此法很少单独使用，可与盐析法结合用。而低温有机溶剂沉淀法：用与水可混溶的有机溶剂，甲醇，乙醇或丙酮，可使多数蛋白质溶解度降低并析出，此法分辨力比盐析高，但蛋白质较易变性，应在低温下进行。
（二）根据蛋白质分子大小的差别我们可将蛋白质的分离纯化方法分为：透析与超滤，和凝胶过滤法
蛋白质的透析与超滤都是利用蛋白质的分子大小不同进行的分离，透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。超滤法则是利用高压力或离心力，强使水和其他小的溶质分子通过半透膜，而蛋白质留在膜上，可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。蛋白质的凝胶过滤法也称分子排阻层析或分子筛层析，这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶和琼脂糖凝胶。
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